概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測(cè), 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：

疙瘩皮膚病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒圖片1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡(jiǎn)介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列。

（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f1-Amino-2-methylanthraquinone  中文名：1-氨基-2-甲基蒽醌  分子式：C15H11NO2  度：98.0%  小鼠皮質(zhì)醇(Coisol)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

2-Amino-4-methylbenzothiazole  中文名：2-氨基-4-甲基苯并噻唑  分子式：C8H8N2S  度：98.0%  小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

2-Amino-6-methylbenzothiazole  中文名：2-氨基-6-甲基苯并噻唑  分子式：C8H8N2S  度：98.0%  小鼠甲基化酶(Methylase)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

5-Amino-2-naphthalenesulfonic acid  中文名：5-氨基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO3S  度：98.0%  小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽elisa試劑盒   小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽試劑盒、小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

2-Aminophenyl phenyl sulfide  中文名：2-氨基二苯硫醚  分子式：C12H11NS  度：98.0%  小鼠超敏C反應(yīng)蛋白elisa試劑盒   小鼠超敏C反應(yīng)蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠超敏C反應(yīng)蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠超敏C反應(yīng)蛋白試劑盒、小鼠超敏C反應(yīng)蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠CXC趨化因子配體16(mouse CXCL16)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Marsdenoside F  858360-61-9  中文名：  分子式：C39H60O14 

小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Benzoin oxime  441-38-3  中文名：安息香肟  分子式：C14H13NO2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Chlorpheniramine maleate  中文名：馬來酸氯苯那敏  分子式：C20H23ClN2O4  度：98.0%

小鼠CXC趨化因子配體16   英文名稱：   CXC chemokine ligand 16   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CXCL16  Benzophenone  中文名：二苯甲酮  分子式：C13H10O  度：98.0%

小鼠CXCR4(mouse CXCR-4)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Benzoin methyl ether  3524-62-7  中文名：安息香甲基醚  分子式：C15H14O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-4   英文名稱：   insulin-like growth factors binding protein-4   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IGFBP-4  Potassium benzylpenicillin  113-98-4  中文名：青霉素鉀  分子式：C16H17KN2O4S 

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3   英文名稱：   insulin-like growth factors binding protein-3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IGFBP-3  Potassium benzylpenicillin  113-98-4  中文名：青霉素鉀  分子式：C16H17KN2O4S  度：98.0%   

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2   英文名稱：   insulin-like growth factors binding protein-2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IGFBP-2  Potassium benzylpenicillin  中文名：青霉素鉀  分子式：C16H17KN2O4S 

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1   英文名稱：   insulin-like growth factors binding protein-1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IGFBP-1  Potassium benzylpenicillin  中文名：青霉素鉀  分子式：C16H17KN2O4S  度：98.0%

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白 -4(IGFBP-4)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Ponasterone A  中文名：坡那甾酮A  分子式：C27H44O6  度：98.0%

疙瘩皮膚病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒圖片N-Acetyl-D-tryptophan  2280/1/5  中文名：N-乙酰基-D-色氨酸  分子式：C13H14N2O3  度：99.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠抗可提取核抗原抗體ENA抗體   英文名稱：   Mouse Exactable Nuclear Aibody   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ENA

N-Acetylcaprolactam  1888-91-1  中文名：N-乙酰己內(nèi)酰胺  分子式：C8H13NO2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠β內(nèi)啡肽   英文名稱：   Beta-Endorphin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   β-EP

N-Acetyl-5-hydroxytryptamine  1210-83-9  中文名：N-乙?；?/span>-5-羥基色胺  分子式：C12H14N2O2  度：99.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠表皮生長(zhǎng)因子   英文名稱：   epidermal growth factor-like growth factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   EGF

N-6-Methyl-7,7-dioxo-2-sulfamoyl-5,6-dihydro-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-yl]acetamide  147200-03-1  中文名：  分子式：C10H14N2O5S3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠細(xì)胞色素氧化酶（CC0）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

N6-Benzyladenine  1214-39-7  中文名：N6-芐基腺嘌呤  分子式：C12H11N5  度：98.0%      小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝