皮膚刺激試驗(yàn)

皮膚刺激是指皮膚接觸受試物后產(chǎn)生的可逆性炎性癥狀。

試驗(yàn)方法的原則

受試物應(yīng)以一次劑量或多次劑量涂(敷)于健康的無破損的皮膚上。每種

受試物至少要用4只健康成年動物。uu011

試驗(yàn)方法

急性皮膚刺激試驗(yàn)(一次皮膚涂抹實(shí)驗(yàn))

1 試驗(yàn)前24小時，將實(shí)驗(yàn)動物背部脊柱兩側(cè)毛剪掉，不可損傷表皮,去毛范圍左、右各約3cmX 6cm。

2 取受試物0.1ml (g)滴在2. 5cmX2.5cm大小的四層紗布上敷貼在一側(cè)皮膚上，或直接將受試物涂在皮膚上，然后用一層油紙覆蓋，再用無刺激性膠布和繃帶加以固定。另一側(cè)涂賦形劑作為對照。敷用時間一般為24小時，亦可一次敷用4小時。試驗(yàn)結(jié)束后用溫水或無刺激性溶劑除去殘留受試物。

3 于除去受試物后1、24和48小時觀察涂抹部位皮膚反應(yīng)，按表1和表2進(jìn)行皮膚反應(yīng)積分和刺激強(qiáng)度評價。

多次皮膚刺激試驗(yàn)

1 先將實(shí)驗(yàn)動物背部脊柱兩側(cè)皮膚的毛剪掉或剃掉，去毛范圍各為2.5cmX 2.5cm。

2 取受試物0. 1~0.5ml (g)涂抹在一側(cè)皮膚毛，另一側(cè)涂賦形劑作為對照，每天涂抹1~2次，連續(xù)涂抹14天每次涂藥前應(yīng)剪毛，不得損傷皮膚保證受試物與皮膚充分接觸。

3 每天觀察皮膚反應(yīng)，按表1評分。脫悄積分為1。最高刺激指數(shù)為14(觀察次數(shù)) X8(總積分?jǐn)?shù))=112。

眼刺激試驗(yàn)

眼刺激性是指眼表面接觸受試物后產(chǎn)生的可逆性炎性變化。

1 試驗(yàn)方法的原則

• 受試物應(yīng)以一次劑量或多次劑量滴入(涂入)或噴灑眼內(nèi)。
• 每種受試動物的眼睛應(yīng)保證無任何炎性反應(yīng)和眼損傷。
• 每組試驗(yàn)動物數(shù)至少4只，采用自身對照，首選動物為家兔。
• 受試物使用濃度一般用原液或用適當(dāng)無刺激性賦形劑配制的50%軟膏或其他劑型。
• 已證明有皮膚刺激性的物質(zhì)，不必進(jìn)行本項(xiàng)試驗(yàn)。

2 試驗(yàn)方法

一次眼刺激試驗(yàn)

• 將液態(tài)或軟膏(0. 1ml或100mg)受試物滴入(涂入)實(shí)驗(yàn)動物一側(cè)結(jié)膜囊內(nèi)，另一側(cè)眼作為對照。滴藥后使眼被動閉合5~10s，記錄滴藥后6、24、48和72小時眼的局部反應(yīng)，第4、7天觀察恢復(fù)情況。觀察時應(yīng)用熒光素鈉檢查角膜損害，最好用裂隙燈檢查角膜透明度、虹膜紋理改變。
• 如果受試物明顯引起眼刺激反應(yīng)，可再選用6只動物，將受試物滴入一側(cè)結(jié)膜囊內(nèi)，接觸4s或30s后用生理鹽水沖洗干凈，冉觀察眼的刺激反應(yīng)。
• 按表4所列眼損害分級標(biāo)準(zhǔn)積分，再按表5進(jìn)行眼刺激強(qiáng)度的評價。

多次性眼刺激試驗(yàn)

將受試物原液0.1ml或配制成的50%軟膏約100mg 滴入或涂入一側(cè)結(jié)膜囊內(nèi)，另一側(cè)眼作為對照，每日次，連續(xù)14天。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，繼續(xù)觀察7~14天，按表4分級標(biāo)準(zhǔn)記錄眼的刺激反應(yīng)，并按表5眼刺激性評價標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行眼刺激強(qiáng)度的評價。

結(jié)果評價

按上述分級評價標(biāo)準(zhǔn)評定，如一次或多次接觸受試物，不引起角膜、虹膜和結(jié)膜的炎癥變化，或雖引起輕度反應(yīng)，但這種改變是可逆的，則認(rèn)為該受試物可以安全使用。

在許多情況下，哺乳動物眼的反應(yīng)較人敏感，從動物試驗(yàn)結(jié)果外推到人可提供較有價值的依據(jù)。